肉的宰后嫩化关键归因于肌原人造黏胶人造纤维的结构的的破裂，肌原人造黏胶人造纤维的结构的是由内源性蛋清电离酶可光降解肌原人造黏胶人造纤维和細胞骨架蛋清引起的。与几十块年来一致是重视的点的钙蛋清酶的不同，胱天蛋清酶（caspases）近日作为感需求时题。胱天蛋清酶在細胞凋亡的制定第一阶段起着至关首要的用处，之中caspase-3在生前蛋清电离中的用处是双等方面和有难度的，由此直得进一歩理论探究。S-亚硝基化能够转换钙缓解压力、养分新陈代谢、蛋清质可光降解和細胞凋亡来转换色泽，还包括嫩度和持水水平。现已理论探究发展S-亚硝基化需要下跌依靠线粒体的caspase-3级联现象，这概率是肌肤細胞凋亡和羊肉品控变化规律的问题。caspase-3的理论探究省级重点是其与細胞凋亡的的关系，可是，越来越多有理论探究浅论S-亚硝基化转换caspase-3的新机制。

2024年9月由沈阳林业二本大学张万刚讲解精英团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生态学为该研究提供了亚硝基化遮盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文标题格式：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2026年的影响因素：5.7

发表过时光：2024年9月

消费者工作单位：南京农业大学

学习材质：蛋白

拜谱保证科技：亚硝基化修饰组学

技术应用线路：

一、探讨后果

01.Caspase-3活性酶

现阶段尚不清除NO对caspase-3的压打造用什么情况下归因于NO介导的S-亚硝基化，区别氨水浓度系数的GSNO对于外源性NO生产，以促进caspase-3的休外S-亚硝基化。结局取决于，与不会GSNO的组对比，100、200和400μM GSNO组的caspase-3亲水性强势变低（图1），与原先报道范文相符。GSNO治疗变低caspase-3亲水性的隐藏的因为仍亟待揭示。

图1 其他渗透压的GSNO解决对caspase-3灵活性的决定

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化的情况

钻研Caspase-3的亚硝基化阶段，以具体分析GSNO对Caspase-3的反馈性。经GSNO治疗后，的检查到caspase-3血清S-亚硝基化标准多（图2）。这个的结果说明，外源性GSNO培养教育可顺利诱导性caspase-3的身体S-亚硝基化。令人感动惊诧的是，在沒有GSNO的存在的比对组中的检查到这个衰弱的S-亚硝基化带，这说明caspase-3很有可能遭受内源性的S-亚硝基化。那么，本钻研中caspase-3的S-亚硝基化阶段较高，而caspase-3的化学活化有效降低，这与之间的钻研保持一致。那么，caspase-3的特情人S-亚硝基化表达位点尚不了解，还还要进一个步骤的打磨。

图2 GSNO补救对caspase-3S-亚硝基化横向的不良影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化绘制组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。暗蓝色符号的队列数字代表S-亚硝基化肽，灰色符号的C数字代表S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3吸附结血清

结核蛋清做为有一种至关根本的人体细胞膜骨架核蛋清，在保护肌人体细胞膜构成的构成系统性和回缩性部分起着至关根本重大意义，研究分析S-亚硝基化caspase-3对结核蛋清吸附的铭感性和理性具备着至关根本重大意义。与Std（未用胱天核蛋清酶-3和GSNO孵育的初期肌食物氯纶核蛋清）组不同于，0 μM GSNO组（肌原食物氯纶和caspase-3的孵育，无GSNO）的系统结核蛋清硫水分份量可观消减，显示caspase-3对结核蛋清具备着潜在性的核蛋清水解反应学习能力。在GSNO孵育后，系统结核蛋清的硫水分份量很大扩大（P < 0.05）。除此以外，当GSNO氧浓度增大时，系统结核蛋清的硫水分份量持续性上浮（P < 0.05）（图5）。一项感觉呈现，SNO淡化的caspase-3以平均水平信任的原则缓和结核蛋清的吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结球蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3吸附肌钙蛋清-T

肌钙蛋清-T (TnT)是原肌球蛋清自动调节器负责管理肌肉组织伸缩的丝条的必备肌原棉玻璃黏胶纤维蛋清。TnT的吸附特殊特点是在线检则到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化生活条件下，caspase-3对TnT的吸附前提如图是6随时，与Std组（不标caspase-3和GSNO的肌原棉玻璃黏胶纤维）想必，caspase-3组中30 kDa TnT段落特殊加强，证实caspase-3参与到了TnT的吸附，除此以外，caspase-3与GSNO的孵育形成30 kDa TnT上升。在100和200 μM GSNO组两者之间不存在在线检则到特殊的差异化(P > 0.05)，而当GSNO的渗透压完成400 μM 时，该段落特殊需要减少(P < 0.05)。这么多得出结论证实了SNO遮盖的caspase-3对TnT吸附的自动调节角色。结蛋清和TnT是caspase-3的刺激性底物，而GSNO外理大大减少caspase-3的吸附性也许形成肌原棉玻璃黏胶纤维蛋清吸附层次大大减少。上面上述一系列的，NO分析的S-亚硝基化需要凭借遮盖半胱氨酸残基来自动调节器caspase-3的吸附性，借以进的一步影向其对结蛋清和TnT的蛋清溶解技能，关键在于影向牛羊肉品味。

图6. S-亚硝基化caspase- 3降解塑料肌钙淀粉酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人心得体会

本理论研究目的试论S-亚硝基化对caspase-3表达的影晌以及其那么对牛羊肉片肌原钎维体内分解的影晌。淀粉酶S-亚硝基化都可以表达caspase-3的半胱氨酸残基，最后以至于caspase-3吸附性降低，进一大步治理和改善了其对牛羊肉片肌原钎维淀粉酶的淀粉酶溶解的能力。

三、拜谱总结

学习使用了酶活核查，亚硝基化呈现组学浅析，WB等检侧方式，发现淀粉酶酶S-亚硝基化能够呈现caspase-3的半胱氨酸残基，这致使了caspase-3灵活性的拉低，并举第一步调节了其对牛羊肉肌原仟维淀粉酶酶的淀粉酶酶淀粉水解本事。本学习为表示淀粉酶酶质亚硝基化对色泽的管控制度作为一个新的移动镜头。

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规范学术论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663